Phương pháp kiểm tra nhanh độc tố nấm mốc Aflatoxin

1.Mục đích sử dụng với kít test nhanh aflatoxin – Độc tố nấm mốc

RIDA®QUICK Aflatoxin RQS là phương pháp định lượng (đánh giá với RIDA®QUICK Aflatoxin RQS) thử ngiệm miễn dịch trên vạch dấu để phát hiện aflatoxin trong ngô.

*Aflatoxin là chất chuyển hóa thứ cấp của các loài nấm thuộc Aspergillus flavus,parasiticus và nomius.Những loại nấm xảy ra ở các vùng nhiệt đới ẩm và do sự ô nhiễm của thực phẩm thực vật diễn ra ở các nước đang canh tác.Aflatoxin thuộc vào các chất xảy ra mạnh nhất.

2.Nguyên lý kiểm tra

Cơ sở kiểm tra là dựa trên sự miễn dịch trên que thử, trên que thử có chứa phản ứng kháng nguyên-kháng thể.Kháng thể đặc hiệu chống lại độc tố Aflatoxin nhận ra aflatoxin trong các phân tử trong mẫu.Kết quả được đánh giá và đọc nhanh bằng RIDA®QUICK Aflatoxin RQS.Dòng điều khiển không bị ảnh hưởng bởi Aflatoxin trong mẫu và có trong tất cả các trường hợp để chứng minh các dải test là hợp lệ.

Ngoài ra còn có thể sử dụng, Đĩa thạch đông khô pha sẵn Compact Dry để phân tích độc tốc nấm mốc

3.Thuốc thử (theo kit)

Mỗi bộ có đủ thuốc thử cho 20 bài test.Mỗi bộ test có chứa:20 que thử và một lọ dung môi (4,5ml).

4.Dụng cụ và hóa chất yêu cầu (không có trong bộ đi kèm)

4.1.Dụng cụ

Máy nghiền mẫu
Cân
Máy lắc( tùy chọn)
Giấy lọc
Ống đong
Pipet 50-100 µl
Máy phân tích nhanh độc tố nấm mốc

4.2. Hóa chất

Methanol (70%) cần thiết để điều chỉnh độ chính xác.
Cồn ethanol (50%) cần thiết để điều chỉnh độ chính xác.

5.Cảnh báo và biện pháp phòng chống cho người sử dụng

Bài test chỉ nên được thực hiện bởi các nhân viên được đào tạo.Các hướng dẫn sử dụng phải được thực hiện một cách nghiêm túc. Truyền hình cáp việt nam

Các que thử rất nhạy cảm với độ ẩm.Que thử ẩm có thể ảnh hưởng đến xấu đến kết quả bài test. Vì vậy các que thử cần được lưu trữ trong môi trường bảo quản, và sử dụng que thử ngay khi mở bao bì.

6.Bảo quản và lưu trữ

Lưu trữ và bảo quản kit ở nhiệt độ từ (2-8^oC / 35-46^oF).Không được bảo quản các thanh test tại nhiệt độ đóng băng.

Đối với các kit hết thời gian sử dụng sẽ không đảm bảo được chất lượng kết quả phép thử.

Không trao đổi giữa các dung môi thuốc thử giữa các lô bộ kit khác nhau .

7.Chuẩn bị mẫu – Phương pháp kiểm tra nhanh độc tố nấm mốc Aflatoxin

Sử dụng dung môi cho việc chuẩn bị mẫu để nhiệt độ phòng (20-25^oC/68-77^oC) trước khi sử dụng.

Các mẫu phải được bảo quản ở nơi thoáng mát, tránh ánh sáng trực tiếp.Mẫu phải được troonj đều trước khi tiến hành các bước kiểm tra.

7.1 Ngô

Phương pháp chiết USDA/GIPSA với cồn ethanol
Cho 50g mẫu ngô đã được xay vào bình chứa thích hợp
Chuyển 50 g mẫu vào bình trộn.
Thêm 100 ml cồn ethanol(50%).
Trộn hỗn hợp mẫu trên trong 2 phút ở tốc độ cao.
Sau đó để lắng dung dịch trong thời gian 1 phút.
Lấy 1.0ml mẫu trộn vào ống ly tâm.
Ly tâm mẫu trong một phút .
Sử dụng pipet lấy 200 µl dung môi (đi kèm với kit) và 100 µl mẫu sau khi ly tâm vào ống ly tâm mới (lưu ý mỗi lần lấy mẫu nên sử dụng 1 pipet mới )
Lắc đều ống khoảng 5 lần rồi sử dụng 100 µl cho bài test.

Chuẩn bị mẫu bằng methanol hoặc ethanol

Lấy khoảng 10 g mẫu đã nghiền nhỏ vào bình thích hợp và thêm 20ml methanol hoặc 20ml Ethanol (50%)
Đóng ống lại và lắc ống mẫu khoảng 5 phút (bằng tay hoặc với máy lắc)
Để lắng dung dịch trong 3 phút, lọc hoặc ly tâm ( điều này cần thiết để cho methanol và ethanol bay hơi)
Dùng 100 µl dung môi ,thêm 50 µl phần dung dịch phân tách lớp trên của ống đựng mẫu.trộn đều hỗn hợp này và lấy ra 100 µl cho bài test.
Ghi chú: Nếu cần thiết trọng lượng mẫu có thể thay đổi .Và tỉ lệ thể tích methanol hoặc ethanol theo tỉ lệ

Ví dụ:

5g trong 10ml methanol(70%) hoặc 10ml ethanol (50%).

8.Thực hiện test độc tố nấm mốc Aflatoxin

Áp dụng với lượng mẫu là 100 µl trên que thử.
Đọc kết quả sau 5 phút với RIDA®QUICK Aflatoxin RQS